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販売元 Bio-Rad Laboratories, Inc.Bio-Rad Laboratories, Inc.
製品タイプ Lysates and Antigens - Recombinant Protein
画像データ
Schematic image of (A) BiSpyCatcher2, (B) BiSpyCatcher2-CYS, (C) BiSpyCatcher2-CYS3 (D) Fab with SpyTag coupled to BiSpyCatcher2-Cys conjugated to a label via the Cys residue (E) Fab with SpyTag coupled to BiSpyCatcher2-Cys3 conjugated to a label via the Cys residues.

BiSpyCatcher2(H-BiSpyC2)は、柔軟なリンカーでブリッジされたSpyCatcher2(TZC001)の29kDaホモダイマーです。各SpyCatcher2サブユニットは、SpyTagを含む2番目のタンパク質と安定した共有イソペプチド結合を形成できます。反応は混合時に自発的に起こり、迅速で、不可逆的で、高収率であり、優れた特異性を示します。 BiSpyCatcher2には、N末端にHis6タグが含まれています。アスパラギンの脱アミド化を回避するために、2つのキャッチャーのそれぞれにN105D変異が導入されました(Hentrich et al.2020)。

反応は、pH 5〜8、+ 4°C〜 + 37°Cの温度、さまざまなバッファー条件(Ca2 + / Mg2 +は不要)、および界面活性剤の存在下で堅牢です。反応は細胞内でも起こります(invivo)。カップリング反応の速度は濃度に依存するため、BiSpyCatcher2を希釈せずに使用することをお勧めします。

BiSpyCatcher2のすべての異なるフォーマットは、重鎖のC末端にSpyTag2を持つBio-Radの組換えHuCAL®抗体と互換性があります。

BiSpyCatcher2(TZC002)は、BiSpyCatcher2-CYS(TZC002CYS)とBiSpyCatcher-CYS3(TZC002CYS3)の2つの変更バージョンで利用できます。これらは、ユーザーによる部位特異的結合のために、それぞれ1つまたは3つのシステイン残基を含みます。

BiSpyCatcher2-CYSは、遊離システインを介してジスルフィド結合を形成することにより二量体化することができます。これらのシステインに結合する前に、BiSpyCatcher2-CYSを減らす必要があります。たとえば、5 mM DTTを添加し、室温で1時間インキュベートした後、サイズ排除クロマトグラフィーなどでDTTを迅速に除去します。これは、DTTが干渉する可能性があるためです。共役化学。

BiSpyCatcher2-CYS3には、ジスルフィド結合の形成によるオリゴマー化を回避するためのDTTが含まれています。コンジュゲーションの直前に、酸化とジスルフィド結合の形成を回避するために、サイズ排除クロマトグラフィーなどによる高速DTT除去ステップを実行します。
価格 ¥30,000
カタログ番号 TZC002
容量 1 mg
用途 Immunoassay
フォーマット / 標識 Catcher
交差性 Protein/peptide tag
クローン  
免疫動物 N/A
データシート
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